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Id: 4740 Autor: García M., María; Cabezas Sánchez, César; Martos D., Leonor; Gonzáles P., Antero; Acosta C., Rosa. Título: Determinación de anticuerpos IgM contra el virus dengue a partir de sangre absorbida en papel filtro: un método alternativo y sencillo / Determination of IgM antobodies for dengue virus from blood absorbed in filter paper: an alternative and simple method Resumen: Objetivo: Se propone como alternativa la obtención de muestras de sangre total en papel filtro, para la determinación de anticuerpos IgM contr dengue, por ser un método de recolección sencillo y no requerir de muchos cuidados en el envío al laboratorio. Materiales y métodos: De 100 pacientes con diagnóstico clínico de dengue clásico, se obtuvieron en forma simultánea, muestras de suero en tubos al vacío y de sangre total en papel filtro. Ambas muestras fueron evaluadas con el método serológioco ELISA Captura de IgM a los 30 días de obtenida la muestra. Resultados: De las 100 muestras 25 fueron positivas y 75 negativas en suero, 24 positivas y 74 negativas en papel filtro. Se obtuvo una concordancia por índice Kappa de 0,97, sensibilidad y especificidad de 96,0 por ciento y 98,0 por ciento respectivamente, el valor predictivo positivo fue 96,0 por ciento, y valor predictivo negativo fue 98,0 por ciento. Conclusión: Se evidencia muy buena sensibilidad, específicidad y concordancia en la determinación de IgM contra el dengue, al utilizar papel filtro en la obtención de muestra de sangre. Descriptores: DENGUE/diagnóstico FILTROS TEST DE ELISA Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2000/a05v17n1-4.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. med. exp.;17(1-4):21-25, ene.-dic 2000

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Id: 4480 Autor: Montoya Piedra, Ysabel; Campos Baquerizo, Yvan; Hijar Guerra, Gisely; Nolasco Cárdenas, Oscar; Yabar Varas, Carlos Título: Guía de Western Blot y Elisa para el diagnóstico clínico Guide of Western Blot and Elisa for clinical diagnosis- Fuente: Iquitos; Instituto Nacional de Salud; abr. 1999. 27 p. ilus. Conferencia: Presentado en: Curso Teórico Práctico Guía de Western Blot y Elisa para el diagnóstico clínico, Lima, 13-16 abril 1999. Descriptores: WESTERN BLOTTING TEST DE ELISA Localización: PE14.1, INS-33

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Id: 4477 Autor: Acuña B., Maribel; Castillo O., Roger; García M., María. Título: Neutralización por reducción en placas como método específico para el diagnóstico serológico de fiebre amarilla / Neutralization using slides reduction as an specific method for the serological diagnosis of yellow fever Resumen: Objetivos: Estudiar la capacidad neutralizante de muestras séricas humanas para ser empleadas como prueba de confirmación frente a otras técnicas y evaluar la relación de neutralización en diferentes poblaciones para cepas de FA:287-78 (nativa) y 17D (referencial). Materiales y métodos: Se empleó la cepa 17D para la estandarización de la prueba en células VERO utilizando dos métodos (sólido y semi-líquido); además, se selccionaron muestras séricas humanas en base al antecedente vacunal (presente o ausente), a la procedencia (endémica y no endémica) y la positividad a virus del dengue, las cuales fueron evaluadas por ELISA. Las poblaciones seleccionadas se enfrentaron por la prueba estandarizada (PRNT) frente a las cepas de FA:17D (cepa vacunal derivada del prototipo Asibi) y 287-78 (primer aislamiento de FA del Instituto Nacional de Salud del Perú). Resultados: Se obtuvieron buenos resultados con el método semi-líquido, siendo el séptimo día el óptimo de coloración de las placas. De los cuatro grupos seleccionados, tres fueron positivos por ELISA y los resultados por PRNT fueron para la suspensión 17D, 29 negativos y 67 positivos con títulos entre 1:10 y 1:2560; y para la cepa 287-78, 17 negativos y 79 positivos con títulos entre 1:10 y 1: 2560. Conclusiones: La técnica semi-líquida con tiempo de colaboración al séptimo día ofrece óptimos resultados en plaqueo y neutralización y capacidad neutralizante en algunos sueros para ambas cepas. Descriptores: FIEBRE AMARILLA/diagnóstico TESTS DE NEUTRALIZACION TEST DE ELISA Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2001/a04v18n3-4.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. med. exp.;18(3-4):71-76, jul.-dic. 2001

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Id: 4457 Autor: Céspedes Z., Manuel; Glenny A., Martha; Vidal Felices, A.; Balda J., Lourdes; Suárez M., Victor. Título: Prueba de Elisa indirecta para la detección de anticuerpos IgM para el diagnóstico de leptospirosis humana / Indirect ELISA test for the detection of of IgM antibodies in the diagnosis of human leptospirosis Resumen: Para el diagnóstico temprano de enfermedades con cuadro clínico inespecífico como la leptospirosis, es necesario la confirmación laboratorial mediante pruebas específicas, con la finalidad de que el diagnóstico sea más acertado y rápido. Objetivo: Se realizó un estudio comparativo entre la microaglutinación (MAT) y la prueba de ELISA indirecta estandarizada con un "pool" de antígenos de Leptospira interrogants, para la detección de anticuerpos IgM, en muestras de suero de fase aguda del leptospirosis humana. Materiales y métodos: 40 muestras de pacientes con sospecha clínica y con títulos de 1:100-1:12800 por la prueba de MAT, 80 muestras negativas de pacientes aparentemente sanos con enfermedades como Brucelosis, Sifilis, Tifus murino, Hepatitis B, Fiebre Amarilla, Dengue y Enfermedad de Carrión fueron evaluadas por ELISA IgM. Resultados: Se obtuvo una sensibilidad de 97,5 por ciento y especificidad de 98, 75 por ciento, no observándose reacción cruzada con otras enfermedades. Conclusión: ELISA IgM validado en el laboratorio es suficiente sensible, específico y de fácil aplicación para el uso como prueba de aterrizaje en una infección por Leptospiras con la subsecuente confirmación por MAT. Descriptores: TEST DE ELISA TEST DE AGLUTINACION LEPTOSPIROSIS LEPTOSPIRA INTERROGANS Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2002/a04v19n1.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud pública;19(1):24-27, ene.-mar. 2002

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Id: 4124 Autor: Glenny A., Martha; Mendoza U., Leonardo; Falconí R., Eduardo. Título: Detección de anticuerpos contra Borrelia burgdorferi e identificación de garrapatas ixodidas en Piura y Amazonas, Perú / Detection of antibodies against Borrelia Burgdorferi and ixodids ticks identification in Piura and Amazonas, Perú Resumen: Objetivos: Detectar anticuerpos IgG/IgM contra Borrelia burgdorferi en población general, procedentes de los departamentos de Piura y Amazonas e identificar especies de garrapatas probablemente incriminadas en la transmisión de la enfermedad de Lyme. Material y Métodos: Entre agosto del año 2001 y junio de 2002, se colectaron muestras de sangre de 232 pobladores procedentes de ocho localidades del Departamento de Piura y 12 del Departamento de Amazonas, para evaluar mediante ELISA CaptiaTM Lyme IgG/IgM (Trinity biotech) la presencia de anticuerpos contra Borrelia burgdorferi. Además, se colectaron garrapatas en animales domésticos por búsqueda directa. Resultados: Se detectó seropositividad en 9,9 por ciento de los sueros evaluados. Asimismo, de 433 garrapatas colectadas se identificaron los géneros: Ixodes (5,5 por ciento), Amblyomma (18,0 por ciento), Rhipicephalus (23,5 por ciento), Anocentor (31,1 por ciento) y Boophilus (21,7 por ciento). Conclusiones: Existen personas seropositivas por Borrelia en Piura y Amazonas, coincidiendo con los hallazgos realizados en Sapillica en el año 1992, además se detectó la presencia de garrapatas del género Ixodes en Piura. Descriptores: Enfermedad de Lyme Infecciones por Borrelia Borrelia burgdorferi Test de ELISA Garrapatas Ixodidae Peru Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2004/a05v21n01.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica;21(1):23-27, ene.-mar. 2004

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Id: 4090 Autor: Gallegos V, Karen; Baldeviano V, Christian; Marcelo Ñ, Adolfo; Padilla R, Carlos. Título: Clonamiento, expresión y seroreactividad del antígeno recombinante flagelina de Bartonella bacilliformis / Cloning, expression and seroreactivity of recombinant antigen flagellin of Bartonella bacilliformis Fuente: Rev. peru. med. exp. salud publica;22(1):39-46, ene.-mar. 2005. ilus, tab. Resumen: Objetivos. Clonar el gen de la flagelina A (flaA) de Bartonella bacilliformis, expresar y evaluar preliminarmente la seroreactividad de la proteína recombinante a sueros de pacientes con Bartonelosis por B. bacilliformis. Materiales y Métodos. Se diseñó una pareja de oligonucleótidos iniciadores ûBbFlaA1 y BbFlaA2û para la amplificación del gen completo de la flagelina flaA de B. bacilliformis. El producto de amplificación obtenido se clonó en pGEM y luegose subclonó en el vector de expresión pGEX4T-1. Se indujo la expresión de la proteína de fusión rBbFlaA-GST con isopropil tio-β-D-galactosido (IPTG). La proteína de fusión producida fue digerida con trombina para liberarla de GST. Finalmente, una prueba de ELISA fue estandarizada para detectar los anticuerpos IgG contra la proteína de fusión rBbFlaA-GST y rBbflaA libre de GST. Se evaluaron sueros de pacientes con diagnóstico de Bartonelosis por B. bacilliformis (n= 30), sueros de individuos sanos (n= 20) y sueros de pacientes con otras enfermedades de posible reactividad cruzada; entre ellas, Brucelosis (n= 3), leptospirosis (n= 3) y salmonelosis (n=7). Resultados. Se determinó quepara la expresión óptima en E. coli BL21 de la proteína de fusión rBbFlaA se requiere que el cultivo crezca en caldo LB/ampicilina a 30 °C suplementado con 2 por ciento de glucosa a partir de un preinóculo de 100 μL (crecido por toda la noche), hasta que alcance una densidad óptica de 1 OD600 y se induzca por dos horas con 2,5 mM de IPTG. Finalmente, el 57,6 por ciento (17 de 30) sueros de pacientes con diagnóstico confirmado de bartonelosis reaccionaron con la proteínarecombinante BbFlaA en el formato de ELISA. Conclusiones. Se logró expresar exitosamente en E. coli la proteína recombinante BbFlaA de B. bacilliformis, determinándose un protocolo de expresión y de purificación de rBbFlaA para la producción de esta proteína. Así también, el antígeno rBbFlaA es reconocido por anticuerpos de sueros de pacientes con Bartonelosis causada por B. bacilliformis. Descriptores: Bartonella bacilliformis Flagelina Test de ELISA Proteínas Recombinantes Infecciones por Bartonella Medio Electrónico: http://www.bvs.ins.gob.pe/insprint/rev/med_exp/sp2005/a07v22n1.pdf / es Localización: PE14.1, Rev. peru. med. exp. salud publica;22(1):39-46, ene.-mar. 2005

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